A levedura metilotrofica Pichia pastoris tem sido utilizada com sucesso para a expressao de varias proteinas heterologas sendo que diversos vetores ja foram desenvolvidos para este sistema. Os principais vetores de expressao de P. pastoris sao baseados no promotor do gene AOX1 que codifica a enzima alcool oxidase 1. Alguns estudos tem sido realizados para o uso de promotores alternativos. Em nosso laboratorio foi isolado e caracterizado o promotor do gene PGK1 de P. pastoris (PPGK1), um promotor forte e constitutivo, que representa uma alternativa promissora para a construcao de novos vetores. O objetivo deste estudo foi determinar a regiao promotora minima do PPGK1 por meio de delecoes controladas utilizando o gene da -amilase de Bacillus subtilis como gene reporter. Quatro delecoes foram obtidas sendo que a menor (PPGK 3), com 400 pb, manteve atividade promotora. Foi demonstrado que esta sequencia e capaz de dirigir a integracao de um vetor no genoma de P. pastoris e 51% dos clones transformantes tiveram mais de uma copia integrada. O uso deste promotor propiciou a expressao heterologa de -amilase em altos niveis (250 U.mL-1)."