A proteómica subtractiva e a vacinologia inversa foram utilizadas para conceber uma vacina quimérica de múltiplos epítopos contra a melioidose, uma doença infecciosa grave causada pela bactéria multirresistente Burkholderia pseudomallei. A partir de 21 proteomas não redundantes de agentes patogénicos, foram selecionadas quatro proteínas como candidatas a vacinas com base na essencialidade, virulência, não-homologia com humanos, disponibilidade estrutural, localização subcelular e antigenicidade. Os principais complexos de histocompatibilidade de classe I, II e epítopos de células B foram previstos e avaliados quanto à imunogenicidade, solubilidade, alergenicidade e hidrofilicidade. Foi construída uma vacina quimérica utilizando os epítopos, os adjuvantes, os ligantes e as sequências PADRE. As simulações de docking e dinâmica molecular confirmaram interações entre alelos HLA e TLR4, indicando o potencial para provocar uma resposta imunitária, demonstrando a utilidade de ferramentas computacionais no desenvolvimento de vacinas contra B. pseudomallei.